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染料(Dye)

染料是個很好的殺菌劑,例如紫藥水、藍藥水、紅藥水、黃藥水等都是染料,但人類已經不使用,現在可用來放入魚缸殺死水中細菌,而實驗室用染料的十分之一或百分之一就可以殺死細菌,所以不用擔心實驗中染完的細菌還會有問題
種類:
A. aniline dye(苯胺染劑)
B. mercurial compounds(汞化物)

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三氯殺(Triclosan)

A. 效果:可殺死細菌但對其他有機物無效
B. 應用:為常見防腐因子加在除臭的肥皂及牙膏裡

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氯已定(Chlorhexidine)

A. 可以用來浸泡、殺菌,跟酒精比起較不易揮發,但效果比酒精差,為何還使用它的原因是因為在需要浸泡時,酒精容易揮發而失去其效果,而使用chlorhexidine 較不會,在需要浸泡後隨時使用是個不錯的選擇
B. 效果
a. 有廣泛的殺菌能力
b. 與酒精比起來作用時間較長
c. 有機物質及高 pH 值會影響效果

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四級銨化物(Quaternary Ammonium Compounds)

A. 分類:
bacteriostatic(制菌劑)-低濃度的此類化合物
bactericidal(殺菌劑)-高濃度的此類化合物
B. 效果
a. 由四個胺基鹽與氮共架所形成的化合物,8~18 個長炭鍊效果最好,屬於low-level disinfection
b. pseudommas(綠膿桿菌)、mycobacterium(分枝桿菌)、fungustrichophyton(髮癬菌屬)、病毒、及bacterial spores(細菌性的胞子)對此化合物具抗藥性,有些菌株甚至可Quaternary ammonium solutions 中快速生長
c. 此類化合物會被界面活性劑、有機物、稀釋等使之無效
C. 作用
這些化合物使細胞膜 denature(變性),將細胞內胞器釋出,可殺菌及清潔,但僅用來作prewash(預洗)的動作,不可用來滅菌

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界面活性劑(Detergent, surfactants)

A. 定義
使防水的表面更為 wettable(濕潤)
B. 分類
a. anionic detergent(陰離子界面活性劑)
b. cationic detergent(陽離子界面活性劑)
c. nonionic detergent(中性界面活性劑)
C. 小迷思
Question:肥皂是否具有殺菌能力呢?
Answer:沒有!那吃飯前幹嘛洗手呢?
原因:肥皂是界面活性劑,會產生wettable(濕潤)的效果,手上有髒東西時肥皂會分將之分離,接著沖洗掉讓手乾淨,但是被沖洗掉的細菌並沒有死亡

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酒精(Alcohol)

A. 效果
a. 對 vegetative bacteria(生長性細菌)、myocobacteria(分枝桿菌)、some fungi(些許黴菌種類)及含有lipid-containing viruses(含有脂質的病毒)而言是有效的消毒劑
b. 但對於 bacterial spores(細菌性的胞子)、some fungi(些許黴菌種類)及含有非脂溶性病毒效果較差
B. 作用
a. 使蛋白質凝固
b. 因為酒精是脂溶性,所以可溶解脂肪達到清潔效果
C. 特性
a. 碳分子越長效果越好,所以以效用來說:丁醇>丙醇>乙醇,但乙醇較便宜,所以廣為使用
b. 不具殘留性
c. 不被有機物活化
d. 酒精在有水的情況下效果較好,因為95%酒精蛋白凝固力太強,使得一群細菌被蛋白質包圍在內,酒精無法殺死細菌,70%酒精可藉由水將酒精滲透進入蛋白質內部進而殺死細菌,所以70%酒精效果較好
e. 70%的酒精V.S.75%的酒精:
兩種濃度的酒精效果差不多,差別在於保存時間的長短,因為經過一段時間後酒精會揮發,濃度皆會下降,70%酒精其殺菌功效下降,而75%酒精濃度揮發後其效果仍可維持在標準以上

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石炭酸(Phenolic Compounds)

A. 外科之父 Joseph Lister 所用之消毒劑,但是現在已經不常使用。現在做為一個標準,稱為phenol coefficient (石碳酸係數)
B. phenol coefficient(石碳酸係數):利用石碳酸為基準,量化其他消毒劑的能力。例如一個消毒劑的石碳酸係數是3,表示它有3 倍的消毒能力

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鹵素(Halogens)

A. Iodine(碘)
a. 碘對於所有的微生物均有殺菌的作用,沒有選擇性與抗藥性,為其最大的特色,但是它不是一個很強的殺菌劑
b. 我們在使用碘時,會讓它與酒精或 potassium iodine (碘化鉀)互溶稱為碘酒。但是一般我們不太使用它,因為酒精揮發後會剩下元素碘,又碘會昇華且有毒性,如果在使用碘酒後包紮,碘昇華後反而會造成患部受傷,所以後來改用有同種殺菌能力的Iodophor(優碘)
B. Iodophor(碘仿)
a. 為一錯化合物,碘在中心,四周為PVP(polyvinylpyrrolidone,為一種人造血漿)。優碘比起碘酒壽命更長,毒性減低,但是殺菌效果不變(跟Glutaraldehyde 一樣)
b. 優碘也可以跟酒精混合,變成殺菌更強,更快揮發,常用於外科手術中皮膚的消毒
c. 但是如果在傷口的處理上有需要用到膠布的(例如幫助縫合或者直接貼上不用縫合時),不可以使用優碘,因為會在膠布下產生潤濕的作用,不太會乾,導致膠布無法黏貼貼不住
C. Chlorine compounds(氯)
a. 元素氯
很強的氧化劑,常用於水的消毒,能跟水中的有機物結合,變成安全的氯化合物,藉此進行消毒,例如自來水中加入氯
*補充:其實之前所提到的過濾&UV-light 滅菌法,也很適用於快速且大量之直接可飲用水之消毒呢
b. HOCl(hypochlorous acid,次氯酸)
氯溶於水的形式
c. OCl(hypochlorite ion,次氯酸鹽)
*補充:最好消毒水的方法是利用臭氧,但是不能用於大型水場,故在台灣不適用

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氧化劑(Oxidizing Agents)

ozone (臭氧),peracetic acid (過氧乙酸),與hydrogen peroxide (過氧化氫)皆可用於消毒,其中的hydrogen peroxide:
A. 在 3%與6%能殺死大部分的病毒;在更高的濃度下(10%至25%)殺死全部的有機體,包括spores(孢子)
B. 常用於消毒直入用的塑膠管,隱形眼鏡,醫用義肢(surgical prosthese)

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烷基化媒劑(Alklylating agent)

包含氧化乙烯、乙醛、戊醯醛,其殺菌作用是由於蛋白質烷基化所致,此類化學物質對細菌之抑制作用不可逆,使得酵素及其催化活性受抑制醛類及氧化乙烯可攻擊蛋白質及核酸之−NH3及−0H基團,亦能與蛋白質的−COOH及−SH基團作用。這類媒劑不但可將生長型的細菌有效殺死,亦能殺死孢子
A. Ethylene Oxide;EO gas;ETO(氧化乙烯)
a. 特性:毒性很強,無色氣體,易溶於水,但通常只用其氣體作為消毒,不使用水溶液
b. 適用:消毒對溫度敏感(不適用)的器械,如塑膠管、針頭、儀器及藥物
c. 作用時間:對所有細菌均有效,包括孢子及結核桿菌,但作用甚慢,在室溫下須4~12 小時方能完全殺菌
d. 機轉:透過對terminal (hydroxyl 氫氧根、carboxyl 梭基、amino胺根、sulfhydryl group 硫化基團)的烷化作用來阻止重要代謝的進行,遂以消滅孢子(sporicidal),達滅菌效果
e. EO gas 作用完後會在表面殘留十分嚴重,會腐蝕、破壞組織,所以滅菌過後還需要24 小時以上的通風時間才能使用
B. 醛類(Aldehydes)
共有兩種,分別是:
醛類
可否使用
備註
Formaldehyde(甲醛)
不可
不能使用,因為具有治癌性
Glutaraldehyde(戊二醛)
在揮發時才會灼傷皮膚與黏膜,所以相比起來更適合使用
*補充:最早賣的時候,Glutaraldehyde 需要加入NaOH(鹼性)才能活化,其商品名為Cidex。直到後來才有中性和酸性的Glutaraldehyde 出現,不過Cidex 還是被廣泛的使用

資料來源:cardinal健康

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高壓蒸氣滅菌法(Autoclaving)

A. 蒸氣在高壓蒸氣滅菌器中是非常有效的滅菌(sterilization)形式,更高溫會使microbial protein(微生物蛋白質)變性(denatured)
B. 殺死細菌的速度快,但受溫度、高壓蒸氣的持續時間、滅菌器大小、蒸氣流動速率、密度和負載量、施加於容器上負載量的影響
C. 必須小心使用,避免產生氣泡(air pocket),從而抑制蒸氣穿透進容器
D. 一般而言,大部分的操作溫度介於121℃~132℃,持續15 分鐘(時間起算點是達該溫度後才開始算起,並不是從室溫開始加熱的時間)甚至更長的時間
E. 當壓力到達 15 磅∕平方英吋時,溫度可達121℃,維持住此溫度15 分即可達滅菌效果
F. 而當壓力更大,達25 磅∕平方英吋時,溫度可達132℃,此時只需維持住此溫度達3~5 分鐘即可滅菌
G. 注意:
a. 若要達到高溫,容器的壓力會增加近一倍,因此容器要更加的堅固
b. 而要讓高壓蒸氣滅菌器達到高溫亦需較多的時間
H. 以 Bacillus stearothermophilus spores(枯草桿菌)為殺菌有效檢定指標
a. 特性
此細菌對於溫度、壓力具有較強的抗性,是最不容易死掉的微生物,所以如果此細菌無法存活,則可確定沒有其他任何細菌可存活,因此Bacillus stearothermophilus spores 可為indicator
b. 方法
將這些孢子放在儀器的中央,待結束殺菌流程後取出,在37℃培養
c. 判讀
若滅菌成功,此枯草桿菌孢子未能形成新一代的孢子也不會生長。由此表示其他細菌在同樣環境都死了
I. 高壓蒸空滅菌器滅菌過程
a. 儀器會自動抽真空三次,目的要去除待滅菌器具內的空氣,因為空氣為不良的導熱體
b. 先加溫至 100℃(內部有水,利用水產生水蒸氣加溫至100℃)
c. 抽掉 100℃水蒸氣,抽成真空,再換一次100℃水蒸氣,如此可將裡面所有空氣都換掉(因空氣是很差的帶熱媒體,若將空氣換掉,內部就會非常均勻都是水蒸氣,再來加熱的效果較好)
d. 最後將溫度升到 134℃後,維持住再經3~5 分鐘即可,但從熱機算起的整個滅菌過程總和時間需35~40 分鐘
*補充說明:3M 滅菌帶【運用變色原理】


資料來源:露天拍賣
本產品是專用於壓力蒸氣滅菌的化學指示拉帶,斜型條紋內含特殊染料,當達到一定的滅菌條件121℃後15 分鐘或132℃後4 分鐘,上面的指示劑會由米白色變為深黑色,如果變色不均勻或不徹底,可提示該包裹“不符合滅菌條件”。同時結合壓力蒸氣滅菌包內化學指示卡和生物指示劑來全面衡量殺菌效果。但是變色的程度,容易因人為辨識而有誤差,過於客觀;利用Bacillus stearothermophilus spores 做判斷較佳

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乾熱法(Dry Heat, Hot air)

A. 原理
使細胞脫水,導致細胞內物質沉澱與大分子氧化,但不使之凝結。與濕熱法理不同,對生物分子的破壞亦較濕熱法慢
B. 適用
粉類(高壓滅菌會使其成為糊狀)、油類、玻璃製的精密儀器(易碎裂)等不能以高壓蒸氣滅菌的物品。滅菌效果雖不會比濕熱滅菌有效,但優點是很便宜
C. 由於空氣不是很好的導熱體,熱的擴散及穿透力都相對較慢,因此需要較長的作用時間及更高的溫度,而且又浪費能源,高溫下甚至有物質會被烤壞,所以有需要時才使用乾熱法
a. 171℃ ∕1hr
b. 160℃ ∕2hr
c. 121℃ ∕16hr
D. 檢測的細菌是 Bacillus subtilis var niger,因為很難被乾熱法殺死。此細菌可以用來製作納豆
*補充:濕熱法與乾熱法的比較


濕熱法
乾熱法
熱能傳遞物質
水(液氣態)
空氣
所需溫度適用物品
較低(62134
較高(160170
所需時間
較短(1hr 以內)
較長(1hr 以上)
適用物品
不被濕熱破壞的物品
怕濕的油脂、易碎玻璃
方法
1. 煮沸法
2. 高壓蒸氣滅菌法
乾熱法
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濕熱法(Moist Heat)

A. vegetative organism(繁殖體)死於沸騰,但是spores(孢子)仍然可以存活
B. 不屬於 spores 的都是繁殖體。但spores 受刺激後會變成繁殖體,才可一個變兩個,再變成spores,spores 本身無法繁殖
C. 用沸水消毒物品很沒效率,因為只能維持在100℃,溫度不能再升高
D. 若要完全滅菌,則必須做下面的autoclaving
參見:乾熱法(Dry Heat, Hot air)

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防腐(Antisepsis)

1. 用於生(命)體上的消毒,傷口或是皮膚,因此安全及有效是選用時的最大考量
2. 用於antisepsis 的化合物與用於disinfection 的相近但不完全相同
A. 時間長短:disinfection 較不用考慮浸泡時間的長短,antisepsis 卻須納入考量
B. 具刺激性與否:浸泡器械時,若使用具刺激性的液體,只要在浸泡完後沖洗器械即可。
但用於antisepsis 卻不可以具刺激性。因此,Phenolics、Chlorine、Glutaraldehyde、Quaternary ammonium compounds 等刺激性液體不適用於antisepsis
參見:感染的控制(The control of infection)

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消毒(Disinfection)

1. 消毒的效能會受以下幾點影響
A. 被消毒物質的本質:
消毒方式因物品不同而不同,環境的不同也會造成消毒標準的差異,舉例來說醫院的餐廳與一般餐廳消毒的標準就有很大的不同呢
B. 污染的數量及適應消毒的能力:欲消毒的物品可能含有何種微生物,及本身的乾淨與否皆會有所影響
C. 有機體的數量(可能會抑制消毒效果)
D. 消毒的種類及濃度
E. 暴露在消毒的時間及溫度:溫度每增加 10℃,化學反應可增加一倍,因此可時常看到某藥物消毒的最佳使用溫度是45~50℃。時間的長短也很重要,若消毒劑上有註明時間請務必遵守,否則無法達到效果
2. 消毒可分為三種程度
A. High-level disinfection
a. 現在強度根本等於滅菌,差別在此用於作為侵入式療程,而無法承受一般滅菌方式(指autoclaving)的東西
e.g.心臟導管、內視鏡、手術器材與塑料或其它的組件
b. 常用的消毒方法為 moist heat 並使用下列的化學液體:glutaraldehyde ,hydrogen peroxide(過氧化氫),peracetic acid,chlorine dioxide。
c. 最常用的是 glutaraldehyde,因為只有它是冷滅菌
d. 消毒前最好可以 prewash(預處理),先弄乾淨再消毒,才可以得到最好的效果
B. Intermediate-level disinfection
a. 在此消毒標準下,孢子仍可存活
b. 用於清理細菌孢子較少和汙染程度較低的器械表面,非侵入式、安全性較高的器械像是光纖內視鏡、喉鏡、陰道窺鏡、麻醉用呼吸管路…等
c. Alcohols、iodophor compounds(碘仿化合物)、phenolic compounds(酚類化合物)
d. 不同病人間的消毒還是使用 High-level disinfection 比較好,但針對同一病人時使用Intermediate-level disinfection 是可以的
C. Low-level disinfection
a. 許多微生物仍可存活
b. 用於 noncritical(即不會穿過病人黏膜表面或是組織)的器材
e.g.blood pressure cuffs(血壓計的套袋)、electrocardiogram electrodes(心電儀電極)、stethoscopes(聽診器)
c. 就算是 low-level disinfection 仍然有98%以上的消毒率
d. 消毒所需的程度取決於暴露於 pathogenic organisms(致病體)的機率。除了這個也須考慮到場地、花費等等
e. 使用 Quaternary ammonium compounds(四級銨化物)是方法之一
3. 消毒標準的選擇:因應環境不同,會選擇不同的消毒方式,因為越高等級的消毒,花費會越多
參見:感染的控制(The control of infection)

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滅菌(Sterilization)

1. 說明
A. 將所有的microbial forms(微生物)消滅,包括容易再次復甦的生命型態,如bacterial spores(細菌孢子)、mycobacteria(分枝桿菌)、nonenveloped viruses(無套膜病毒)、fungi(真菌)
B. 分為物理性滅菌(physical sterilants)、氣體滅菌劑(gas vapor sterilants)、化學滅菌劑(chemical sterilants)

2. 滅菌法簡表
方法
濃度或程度
物理性滅菌
加壓濕熱
乾熱
過濾
UV 照射
離子輻射

在 121132時有不同持續時間
171小時,160小時,12116 小時
孔徑大小 0.220.45μmHEPAhigh-efficiency particulate air)過濾
暴露在 254 奈米的波長中
微波或γ輻射
氣體滅菌劑
氧化乙烯
甲醛
過氧化氫氣體
電漿氣
二氧化氯

在 2965中,濃度4501200 mg/L,持續2小時
於 6080時需2%5%
於 5560時需30%
高離子化的過氧化氫氣體
視情況而定
化學滅菌劑
過氧乙酸
戊二醛

需 0.2%
需 2%
3. 分項細述
A. physical sterilants(物理滅菌)
a. Moist heat(濕熱法)與Dry heat(乾熱法)
 兩者是醫院最常使用的一種滅菌法,幾乎所有的物質均適用
 除了下列物品例外
 對熱敏感的物品
 具有毒性的物品
 揮發性化學物
 Moist heat
 以水為導熱媒介,水是一種良好帶熱媒體
 121~132℃,15 分鐘左右
 濕熱法的效果比乾熱法好
 Dry heat
 以空氣為媒介,導熱較水差
 需較長時間,且溫度也較高
 長時間高溫狀態下,器材可能會氧化或損壞
b. Filtration(過濾)
 高效能微粒空氣過濾器(HEPA,high-efficiency particulate air filters)
 濾網孔徑 0.22~0.45 微米
 過濾效果可達 99.97%的標準,用於除去空氣或溶液中的細菌和真菌,但剩餘的0.03%可能就是一些病毒和一些微小的細菌
 廣泛運用於無菌操作台、手術室、動物實驗室等高潔淨場所
c. Radiation(輻射)
 ultraviolet(紫外光)
 優點:當紫外光照射之時可以絕對的滅菌,而且事後絕不殘留
 缺點:因為光是直線前進的,所以會有背面死角照射不到的地方
 ionizing radiation(離子性輻射)
 以γ射線為代表
 優點:效果好,可以很徹底的把微生物消滅光
 缺點:高環境汙染(輻射線)、可能會有殘餘的輻射、具傷害性
 冷凍後再加上融解,又使其冰凍,反覆幾次也是可以使微生物死亡,但效果沒有加熱來的好
B. Gas vapor sterilants(氣體滅菌劑):以前是被歸類為chemical sterilants 中
a. ethylene oxide,EO(氧化乙烯)
 在氣體滅菌中最常被用到
 殺菌效果非常好
 因具有高毒性與致癌性,所以使用上必須極為嚴格小心
b. formaldehyde gas(甲醛)
 有 carcinogenic(致癌性),現已禁止使用
 以前主要使用在 HEPA filters 的滅菌
c. hydrogen peroxide vapors(過氧化氫氣體)<2%~3%過氧化氫是雙氧水
 具強氧化性,是一種很有效的滅菌劑
 用於醫療器械滅菌
 Plasma gas sterilization(電漿氣滅菌法)
 過氧化氫被氣化,用很強的能量去觸發它,使其產生無害的水與氧自由基(游離態的氧,為強殺菌劑),來破壞微生物結構,藉此達到滅菌
 是一種很有效的殺菌方式,且又不產生有毒物質(水),因此將有
可能取代氧化乙烯(EO,ethylene oxide),缺點是儀器昂貴尚未普及
 但價格高,目前也尚未 popular
d. chlorine dioxide gas(過氧化氯)
 藉由氧化作用使蛋白變性
 不具毒性,將來也可能取代 EO gas
 目前還處於研發中的階段
e.O3,Ozone(臭氧)
 很不穩定的氣體分子,一碰到有機物,就會分解放出一個氧自由基
 殺菌效果很好,殺菌力為氯的 3000 倍
C. chemical sterilants(化學滅菌劑)
a. peracetic acid(過氧醋酸)
 不穩定,碰到有機質就會釋出一個氧,跟過氧化氫一樣會產生作用
 為無毒且活性高的氧化劑
 因在還原後為醋酸易腐蝕金屬,浸泡時可能造成器械生鏽,尤其是關節處
b. glutaraldehye(戊二醛,戊醯醛)
 為醛類,大的醣分子把有毒的function group 包起來,所以毒性降低,但殺菌力仍然存在
 一般醫療單位常以glutaraldehye 為浸泡用的滅菌劑,常用於侵入性診療且不適合高溫滅菌的器械
 尚有一點點毒性,其揮發的氣體可能會傷害呼吸道
參見:感染的控制(The control of infection)
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感染的控制(The control of infection)

要控制感染,必先了解三種方法各自的definition
1. 滅菌(Sterilization):用物理方法或化學藥劑把所有微生物摧毀殺死,包括細菌孢子
2. 消毒(Disinfection)<用在無生命的器物>:用物理學方法和化學劑將大部份的微生物摧毀,但細菌孢子和其他具抵抗性的微生物(如分枝桿菌、病毒、真菌等)可能存活除外,消毒劑可分為高、中、低三個等級的消毒劑
3. 防腐(Antisepsis)<用在有生命者>(字面翻譯勉強翻為防腐):用化學藥劑抑制或消滅存在於皮膚表面或其他活組織上的微生物;不具殺死孢子的活性

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微生物免疫歷史故事(Microbiology and Immunology historical stories)

1. Before Chris—西元前,中國在秦朝之前就設有點火官,每當有大型瘟疫發生時,君王為了好控制疫情,向人民稱之為天譴而將感染區域隔離之後,便會下令點火官燒掉整個受到傳染的地區,以消滅傳染病。由此可知,古代君王對疾病瘟疫的發生原因還是不甚清楚
2. 1800 Napoleon-19 世紀初,一直到拿破崙戰爭時期,才有較為正式記載醫學的歷史,那時許多戰場都設有野戰醫院,當時的外科處理主要只有切掉爛肉然後縫起來而已,並沒有其他外科處理方式。雖然當時的醫生在做外科手術的時候,也會清洗傷口及開刀用的匕首,但是在野戰醫院這種環境下,開完刀後並不是將手術用的匕首做消毒,而是只在軍靴上擦兩下後就繼續替下一位開刀,可見當時並無任何感染、消毒的概念,士兵受到感染的機率非常高,所以當時進野戰醫院的士兵活著的機率並不大
3. 1813 Thomas-1813 年時,提出有關傷口感染的問題,也知道要做感染的控制預防,但他並不清楚到底該怎麼做
4. 1815 Delpech—他說傷口是會感染的,當時他使用稀釋過的鹽酸(HCl)來消毒,雖然在傷口塗稀鹽酸會感受到劇痛,但這項處理在當時已經是一個劃時代的進步!這顯示他知道傷口是需要處理的,可是卻不知該用哪種化學藥劑來消毒
1815 Lisfranc—同時期的Lisfranc 反對傷口感染,他的觀點較類似中國古代中醫師的想法,認為傷口之所以會感染長瘡,是因為體內有邪毒,認為感染是來自於人體內部。他以當時純度高的碘製劑(碘化合物的型式)來治療感染,但由於純碘是很毒的物質,所以大多數的病人藥到命除,但神奇的是病人的傷口竟然變好了,因為碘本身有殺菌的作用!他以實證醫學的方式證明自己的觀點(傷口感染是由體內邪毒造成),但是卻持續影響人們一直到1850 年,人們仍然不知道該如何預防傷口的感染
5. 1840 Ignas simmelweis—他是匈牙利人,他到當時文藝復興最有名的維也納醫學院當婦產科醫師,他發現只要有醫學院的學生去做產檢,產婦的死亡率就會比較高;然而暑假的時候產婦的死亡率較少,因為醫學院的學生都回家了。因此他推論是由於醫學生在進手術房與產婦接觸之前,雙手碰過大體或其他感染物,導致產婦感染致死。於是他開始要求學生手術前要先
將雙手浸泡生石灰水,洗手消毒後再進行手術。在他提出此方法後,雖然手術死亡率大幅降低,但是因為生石灰水具腐蝕性,學生受不了疼痛,便找校方高層抗議,事後Simmelweis 不但被解職,還被認為是精神病患,關進精神病院,抑鬱而終
1852 Nelaton-與Simmelweis 為同時期的外科醫生。Nelaton 也知道傷口是會感染的,並且確實執行消毒,他利用高濃度酒精(濃白蘭地50~60%)進行消毒,但他與Simmelweis 最大的差別在於他不強迫病人消毒,結果他並沒有得罪任何人,反而因為他的醫院死亡率較低,所以醫院生意大好,也使得他在歷史上留名
6. 1860 Joseph Lister—人稱外科之父,第一個將消毒帶進外科手術中,而且也是第一個成功的人,他當時使用的是石炭酸(Carbolic acid)來進行消毒。但是他當時並不是一位很有名的醫生,所以當他提出他的論點時,其他那些學術派的醫生教授並不加以理會,認為那是異端邪說。甚至到了1883 年的時候,巴黎大學醫學院的學生請他去演講,然而醫學院院長卻阻止學生去聽他的演講。但因為Listerz 的努力不懈,最後也在歷史上留名
7. 1862 Louis Pasteur—法國人,第一個發現到細菌跟感染,也發明了疫苗
8. 1877 Robert Koch—德國人,與Passteur 互為朋友與競爭對手的關係,他證明了病原學說(一個人生病的時候一定有一個特殊的病原,而且此病原是可以分離出來的,分離出來後可以進行純培養,再送回易感受的個體,健康的人會產生相同的疾病),最後他的學說變成科霍氏假說(Koch Hypothesis),後來成為科霍氏準則
9. 1886 Neuber—提出防腐與殺菌(aseptic)的觀念
1894 年橡膠手套的發明與1896 年口罩等用品因消毒殺菌的觀念普及,這些手術用品陸續被發明出來
1912 Bayer—發明70%酒精,距離現在僅100 年,但對當時而言,酒精的發明實為重大的劃時代進步,那時幾乎都是用酒精來消毒,雖然酒精在現代並非一項絕對100%的消毒方法,但仍然是消毒方法中主要的一種
10. 21 century—最後的結論:到現代不管是任何一家醫院,擁有再好的醫療技術,感染率仍舊無法降到0%,還是有2~6%的傷口感染率,可能造成病人因手術感染而死亡

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