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鈉負荷試驗(Sodium loading test)

A. 給大量鈉離子進去,理論上aldosterone分泌量就會減少
B. 方法:
a. 在四小時內IV normal saline 2000ml
b. 檢測plasma aldosterone,aldosterone >12ng/dl則為Hyperaldosteronism(醛固酮過多)=Conn syndrome 陽性反應
C. 但是要注意如果血壓高很久心臟不好的病人可能會導致心衰竭

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下岩樣竇採樣(inferior petrosal sinus sampling, IPSS)

因為腦下垂體從這條靜脈輸出,所以可以測到相對於周邊較高的ACTH量
若是外源性腫瘤則直接分泌高強度ACTH到周邊
a. 靜脈對周邊ACTH比值(IPS to peripheral ratio of ACTH) >2 →中樞高,周邊低 →判斷為small pituitary tumor MRI上看不到小腫瘤,因此直接切掉測出來比較高的那一側腦下垂體
b. 靜脈對周邊ACTH比值(IPS to peripheral ratio of ACTH)<1.8 → 中樞低,周邊高 →判斷為ectopic tumor

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CRH刺激試驗(CRH stimulation test)

經由ACTH抑制試驗判斷為primary,CT判斷有雙側腎上腺腫大(Bilateral adrenal enlargement)時使用
1.方法:
a. 靜脈注射(IV)在下視丘分泌的CRH 1ug/1kg,也就是在ACTH的上游刺激
b. 打完後的第0、15、30、60分鐘測
2.結果
測出的ACTH的量若為比較高的數值(10ug/dl以上),表示ACTH應該是分泌過多,因此證明,第一次測的低數值是錯的,判斷為Secondary

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Metyrapone stimulation test

a. Cortisol製作過程最後步驟:11-deoxycortisol →cortisol
b. 在半夜口服Metyrapone 30mg/kg,隔天早上檢測11-deoxycortisol和cortisol的濃度。由於Metyrapone會抑制使11-deoxycortisol轉變為cortisol的酵素,所以使用Metyrapone後,前一個物質11-deoxycortisol濃度會上升,而下游產物cortisol濃度下降,無法負回饋作用因而使ACTH持續上升
c. 正常值:11-deoxycortisol >7ug/dl (cortisol <10ug/dl)

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Tc-99m-sestamibi

Tl-201及 Tc-99m-sestamibi會被甲狀腺組織及功能活躍的副甲狀腺組織所攝取, 但Tc-99m-pertechnetate(或I-123)就只能由甲狀腺組織攝取。兩者相減,便可看 出功能亢進的副甲狀腺病灶所在。
一般而言,相減掃描的靈敏度比單核種雙時相掃描(如Tc-99m-sestamibi掃描)高。但較為昂貴,而且實行技術比較困難。
Tc-99m-sestamibi原本為心肌造影設計,隨後發現亦可應用於腫瘤造影。經靜脈注射 後被甲狀腺及副甲狀腺攝取,其攝取量與局部血流量和組織代謝活躍程度成正比。正 常狀態下副甲狀腺的放射活性強度較低,不易顯示在影像中。
一、檢查程序
I-123(成人劑量200~500微居里)聚集於甲狀腺中需4小時,故病人需提早到達服藥。 Tc-99m-pertechnetate(成人劑量2~4毫居里)可在Tl-201(成人劑量2~3.5毫居里)或 Tc-99m-sestamibi(成人劑量5~25毫居里)之前或之後注射。由於I-123, Tc-99m及 Tl-201的能窗不同,故可在同一掃描儀同時獲取甲狀腺/副甲狀腺及單獨甲狀腺兩 組影像,而後再進行影像相減處理。不但節省時間,也避免病人位置變動導致的誤 差。或者,也可採先後次序,依序取得甲狀腺/副甲狀腺及單獨甲狀腺兩組影像。
必要時可加做不同方向的平面影像、以針孔準直儀放大或做SPECT。依採用方法不同,造 影程序共需約1~6小時。
資料來源:台北榮民總醫院全球資訊網

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ACTH刺激試驗(ACTH stimulation test)

一、
疑為腎上腺皮質功能減退者。用于鑒別庫欣綜合征的類型。不過對ACTH過敏者不能進行本試驗
1.方法
試驗前日留24h尿,測定尿17-羥、17-酮皮質類固醇,或試驗開始前后測血漿皮質醇;試驗日以ATCH25U溶于5%葡萄糖液500ml中,連續靜滴8h,收集試驗日24h尿,測定尿17-羥及17-酮皮質類固醇;一般連續靜滴ACTH2d,如疑為繼發性腎上腺皮質功能減退者可連續靜滴ACTH 5d,測定方法同上。
資料來源:醫學百科
二、Rapid ACTH stimulation test
給予病患高於一般生理所需250倍的0.25mg ACTH[臨床上通常使用Cosyntropin] (生理上只需1ug ACTH),在30分鐘與60分鐘檢測cortisol濃度,正常值:30分鐘後cortisol > 20ug/dl,不過partial adrenal insufficiency的患者,上游給予了大量的刺激後,仍可使cortisol達到正常濃度,所以要與secondary adrenal insufficiency患者做區分

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胰島素耐受性試驗(Insulin tolerance test, ITT)

胰島素耐量試驗(ITT)是一種醫療診斷過程,在試驗期間,胰島素注射到病人的靜脈中,以評估垂體功能,腎上腺皮質功能,有時用於其他目的。 ITT通常由內分泌專科醫師來進行。
需要先製造低血糖的環境,glucose需< 50 mg/dl。病患經IV注射胰島素(insulin 0.15u/kg)後,每15分鐘測血糖濃度,理論上會在40分鐘左右出現低血糖。在第30, 45, 60, 75, 90分鐘時檢測血糖濃度,可以區分是Secondary adrenal insufficiency或Partial adrenal insufficiency
1.垂體功能低下
正常的皮質醇反應被定義為大於550 nmol/ L,如果病人有皮質醇反應缺陷(低於550 mmol/L,但大於400 nmol / L的)患者可能只需要類固醇來治療重大疾病或壓力。足夠的生長激素反應發生應超過20 mU/L。
2.庫欣氏症(Cushing syndrome):會有低於170 nmol/L的基礎皮質醇水平

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口服葡萄糖耐受試驗(Oral Glucose Tolerance Test, OGTT)

多數篩選性的計畫均使用單一空腹血漿葡萄糖或任一次隨機血糖測量作為第一步工具。然而,根據流行病學的研究顯示,若以目前的診斷標準而言,有相當多的人可能僅具有空腹或餐後的血糖異常狀態。因此,除非同時做口服葡萄糖耐受試驗,上述這些人可能被誤認為正常。所以建議只要是空腹或隨機血糖值略高,就必須做口服葡萄糖耐受試驗的篩檢,以減少因為只做單一檢查而被誤診為沒有糖尿病。最近研究資料建議懷疑有糖尿病或是有糖尿病危險,且其空腹血漿葡萄糖介於100-125 mg/dl(5.6-6.9 mmol/L),或隨機血糖介於100-199 mg/dl(5.6-11.0 mmol/L)時,宜做口服葡萄糖耐受試驗。
資料來源:endo-dm
如果要確定生長激素分泌過多,有可以用口服葡萄糖耐受試驗(Oral Glucose Tolerance Test, OGTT)來確認

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激素功能測定(Hormone function test)

1.直接測量
2.刺激測試
3.抑制測試
4.圖像分析

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放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA)

核子醫學領域裡的體外檢查(in vitro study)即指體外放射分析(in vitro radioassay),是一類以放射性核種標誌的配位體(ligand)為示蹤劑,以結合反應為基礎,在體外完成的微量生物活性物質檢測技術的總稱。而這類技術中,尤以放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA)最具代表性。1950年代末期,S. A. Berson與R. S. Yalow利用放射免疫分析技術測定了人體血漿內胰島素的含量,Yalow女士並於1977年獲得諾貝爾醫學獎(當時Berson先生已過世)殊榮。由於RIA技術的良好特異性(specificity)與靈敏度(sensitivity),此技術已廣泛、成功地應用於人體血漿內微量(10-9~10-15 g)激素、酵素、抗原、藥物的含量。優點是沒有廠牌專一性,可以同時量測多種物質、很穩定,可重複性很高

資料來源:維基百科
一、RIA必備條件
◎ 放射性核種標誌抗原(radionuclide labeled antigen)
高純度抗原 -用來標誌的抗原純度直接影響RIA的特異性、準確度及靈敏用來標誌的抗原純度直接影響RIA的特異性、準確度及靈敏度。故需經過良好的純化工作。
標誌抗原之放射性 -抗原的放射標誌常選用I-125( 半衰期夠長 (T1/2=60 天)能量低但又可被γ-counter測得),亦曾使用I-131、C-14及H-3,但I-131之能量較高、C-14或H-3需使用液體閃爍計數器。I-125可用於標誌激素和蛋白質,因為這類分子上大多數帶有酥氨酸(Tyrosine),而碘原子在正1價或 0價狀態時可直接取代酥氨酸分子上羥基鄰位氫原子而標誌在蛋白質上。一些小分子物質,如類固醇激素、前列腺素以及某些藥物,其分子結構上無酥氨酸,可先在其分子上連接一個酥氨酸甲酯,然後再進行碘標誌。
二、結果
A. 若所測到的放射線強度低,表示和抗體結合的放射性賀爾蒙少,也就是待測賀爾蒙佔據了大部分的抗體,可得知待測賀爾蒙的濃度很高
B. 當所測得的放射線強度高,表示和抗體結合的放射性賀爾蒙多,也就是待測賀爾蒙所佔據的抗體比較少,可得知待測賀爾蒙的濃度很低
為了的到最好的準確度,應選擇待測物結合活性約50%時候的數據

資料來源:元培科技大學

資料來源:boomer

資料來源:millipore

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貝特霍爾德實驗(berthold experiment)

A. 實驗I:目的是確定睪丸是否與公雞的雄性性徵有關:將未發育的小公雞的兩邊睪丸都移除,小公雞長大後不會有雞冠與公雞的雄性行為或特徵,因此得到:睪丸和公雞的雄性性徵以及行為有密切關聯
B. 實驗II:目的是確定睪丸的數目影響雄性性徵的程度:僅移除未發育小公雞的單邊睪丸,保留另一顆,這樣子的小公雞長大後仍有明顯的雞冠與公雞的雄性行為以及第二性徵
C. 實驗III:目的是確定睪丸分泌的物質是否存在個體差異性:移除兩隻未發育小公雞的單邊睪丸,並且將兩隻公雞的單邊睪丸作互換,發現結果與實驗II相同,證明了睪丸分泌的物質對同物種生物都有相同的生理效果

資料來源:endokrinologie

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酵素連結免疫吸附分析法(ELISA, enzyme-linked immunoadsorbent assay)

酵素連結免疫分析法已日益普及,因為非常靈敏且不必如免疫螢光術和放射免疫分析法需要特殊設備。此法的原理是以一種酵素連結到抗原或抗體上,用酵素活性來做為定量標記。有許多方法已經架構完成,視使用的酵素性質及待測的抗原-抗體系統而定。其中廣泛使用的便是酵素連結免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay;ELISA),可以測定抗原或抗體。
ELISA適用於許多病毒的診斷及確認。
資料來源:talung

舉例(辨識HIV的存在)
a. 準備一級抗體、二級抗體
Ÿ 一級抗體:可專一辨識HIV上的envelope protein
Ÿ 二級抗體:可辨識一級抗體恆定區,且攜帶有酵素Horseradish peroxidase
b. 置入檢體與一級抗體後清洗一次,如有HIV時,一級抗體就會附著上
c. 置入二級抗體並清洗一次,如有HIV,二級抗體就會附著在一級抗體
d. 放入無色的被催化物,若有二級抗體存在,就會被酵素催化成有色的產物,即可得知HIV病毒的存在


資料來源:維基百科
首先,必須先製造針對外來轉殖基因所表現的蛋白質具專一性的抗體,稱為一次抗體(或偵測抗體,detection antibody)。檢測時,先將待測檢體蛋白質固定在一個介面上(非專一性的結合),加入一次抗體來偵測捕捉特定蛋白質,再加入另一個與酵素結合並且對一次抗體有專一性之二次抗體(或稱酵素連結抗體,enzyme-labeled antibody),二次抗體與一次抗體產生專一性結合並藉此將酵素也帶到有蛋白質存在的位置,然後加入酵素的受質(substrate),經過一段時間的作用,酵素會催化受質反應而呈現顏色或產生螢光,最後在介面上特定位置若有呈色或螢光保留,即表示有該蛋白質存在。
資料來源:食品藥物消費者知識服務網

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