轉錄是導致基因表現的第一步。轉錄成RNA分子的那段DNA稱為「轉錄單位」,並編碼為一個或一個以上的基因。如果是為蛋白質進行基因轉錄,轉錄的產物為傳訊者RNA(mRNA),接著,經由轉譯,使用傳訊者RNA製造蛋白質。要不然,轉錄後的基因,可編譯為核糖體RNA(rRNA)或轉送RNA(tRNA)、蛋白質組裝反應的其他成分或其他核糖核酸酵素(ribozyme)。
為蛋白質編碼的DNA轉錄單位,不只含有終將直接轉譯成蛋白質的序列(編碼序列),也含有主導與調控該蛋白質合成的序列(調控序列)。在編碼序列之前(在其上游)的調節序列稱為五端非轉譯區(five prime untranslated region,簡寫為5′UTR);在編碼序列之後(在其下游)的調控序列稱為三端非轉譯區(three prime untranslated region,簡寫為3′UTR)。
比起複製DNA的掌控工作,轉錄雖然有校對的機制,但做得較少且無效率;因此,轉錄的精確度比複製DNA差。
和DNA複製一樣,在轉錄過程,DNA的讀取方向是由3′ → 5′。同時,RNA副本是由5′ → 3′的方向合成。雖然,在雙螺旋中,DNA是反向平行的兩股,其中只有一股用於轉錄,稱為模板股。這是因為RNA只有一股,這點與雙股DNA不同。另一股DNA稱為編碼股,因為它的序列與新合成的RNA一樣(不同處是以尿嘧啶取代胸嘧啶)。僅使用3′ → 5′股,就不必像DNA複製一樣,需要岡崎片段(Okazaki fragments)。
轉錄分為5階段:前初始期、初始期、啟動子(promoter)清除期、延長期及終結期。
一、主要步驟
1.前初始期
在真核生物中,RNA聚合酶需要DNA的核心啟動子(promoter)序列,因此,轉錄的初始也需要啟動子。啟動子是DNA的某些區塊,可啟動轉錄,而且在真核生物中,位於由轉錄起點算起的-30、-75、-90鹼基對。核心啟動子是啟動子中的某些序列,為轉錄所必需。在各種專一的轉錄因子存在時,RNA聚合酶可以與核心啟動子結合。
古菌(archaea)曾經是原核生物的一類,其轉錄的前初始期理與真核生物一致,但比較簡單。
2.初始期
細菌是原核生物的一類,當RNA聚合酶與其DNA中的啟動子結合時,轉錄即開始。RNA聚合酶(RNA polymerase)是核心酶,由五個次單元組成:兩個α次單元、一個β次單元、一個β’次單元及一個ω次單元。在初始期起動時,核心酶與σ因子(70號)連結,有助於在啟動子序列下游找到適當的-35和-10鹼基對。真核生物的轉錄初始期比較複雜。
3.啟動子清除期
在合成第一個化學鍵之後,RNA聚合酶必須清除啟動子。在這段時間,傾向於釋出轉錄後的RNA副本,並產生較短的副本。這稱為初始退化(abortive initiation),而且在真核生物及原核生物都很普遍。在σ因子重組之前,初始退化持續進行,結果產生轉錄延長複合體(留下35 bp的移動足跡,bp為鹼基的縮寫,1 bp約3.4Å)。在mRNA的80個核苷酸合成之前,σ因子被釋出。一旦轉錄大約達23個核苷酸,不再分裂,而開始延長。這是需要能量的反應,會消耗腺苷三磷酸(ATP)。
4.延長期
模板股(又稱非編碼股)是DNA中的一股,在RNA合成時,作為模板。當轉錄進行時,RNA聚合酶橫越模板股,並以鹼基配對互補的方式,為DNA模板製造RNA副本。雖然RNA聚合酶沿3′ → 5′方向橫越模板股,如果以編碼(非模板)股與新形成的RNA作為參考點,轉錄也可以描述為沿5′ → 3′方向進行。產生的RNA分子沿5′ → 3′方向沿長,恰為編碼股的複本。其中的差異,除了胸嘧啶更換為尿嘧啶外,RNA含有核糖(五碳糖),而DNA為去氧核糖(少了一個氧原子)。
5.終結期
細菌運用兩個不同的策略終結轉錄。當新合成的RNA分子形成富含G-C的髮夾迴紋區(hairpin loop),且其後方形成一條尿苷酸長鏈,造成RNA與DNA模板分離,稱為Rho獨立轉錄終結(Rho-independent transcription termination)。在另一種「Rho依賴」型的終結中,有一個稱為「Rho」的蛋白質因子使模板與mRNA之間的交互作用變得不穩定,因而由延長複合體中釋出新合成的mRNA。
a. Rho-denendent:ρ protein會接在終止點上游C較多的序列,並利用ATP不停的移動,追上新合成的RNA,使得RNA從模板DNA上分離
b. Rho-indenendent:在快要結束前,有一段前後互補的序列(inverted repeat),可形成髮夾狀(hairpin)結構,用此結構來終止RNA的製造
資料來源:斯特拉斯克萊德大學
資料來源:國科會高瞻自然科學教育平台
資料來源:accessexcellence
▼遺傳物質(genetic material)
顯示/隱藏(show/hide)
在這段時間,傾向於釋出轉錄後的RNA副本,並產生較短的副本
回覆刪除(請問一下甚麼是副本??不好意思我看不太懂><
痾 這資料年代有點久遠,不過推測"副本"是DNA轉錄出來的RNA,但因為有卡primer的關係,所以會比較短~
刪除不是被σ factor卡到嗎?
刪除請問一下 轉錄股=非編碼股(模板股)嗎?
回覆刪除是的 RNA polymerse是附在模板股上轉錄
刪除轉錄單位與轉錄片段之差別為何
回覆刪除RDNA之排列方式與TDNA之排列方式有何異同
回覆刪除幹
回覆刪除太神了吧
刪除