羧基末端方法(Carboxyl-terminal methods)

資料來源：ABRF
最常用作蛋白質的羧基末端的化學鑑定法，就是井分解(hydrazindysis)。樣品溶於無水的井化物(hydrazide)，混合物在一百度下保持二十小時。羧基末端胺基酸便以游離胺基酸釋出；所有其他蛋白質中的胺基酸，都以強鹼性胺基酸井化物存在。羧基末端胺基酸可用Sanger的DNP法，或離子交換色層分析法，與井化物分離。末端胺基酸利用胺基酸分析儀而鑑定，回收率很低，產量還隨蛋白質而異，反應的最佳狀況很難尋得。甚至胺基酸井化物進行甚緩的水解被破壞，因而增加游離胺基酸的含量。

羧基末端胺基酸的醯胺位於支鏈(asparagines or glutamine)或位於α-羧基位置者，也可形成井化物。如果這反應發生，則不生成游離的胺基酸，相反的，以井化物出現。如果是這樣，則井化物必須分離而鑑定，否則井分解法將失敗。井化物與arginine的胍基反應甚慢，部分轉變成ornithine因而增加了建立羧基末端胺基酸arginine的困難性。井分解法的成功需要定量地把胺基酸轉變為井化物，即使是低程度的水解也要避免。過量的井有助於反應的完成，無水狀況也可消除水解。
資料來源：輔仁大學

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