聚丙烯醯胺膠體電泳(SDS Poly-acrylamide-gel-electrophoresis, SDS-PAGE)

A. 原理：使蛋白質分子依其分子量、電荷等因素泳動，讓不同的蛋白質分開，從而分析未知蛋白質溶液中的蛋白質成分

B. 十二烷基硫酸鈉（Sodium dodecyl sulfate，SDS）結構：SDS擁有厭水端（非極性部分）與親水端（極性部分），為一種清潔劑（detergent）

*SDS有解開蛋白質的功能

C. beta-ME（ beta -Mercaptoethanol）是一種還原劑，能打斷蛋白質之雙硫鍵

D. SDS處理：進行SDS-PAGE之前必須先以SDS及-ME加熱處理蛋白質樣本。其中：

a. SDS：解開蛋白質

b.  beta -ME：解開雙硫鍵

c. 加熱：加快反應

d. 示意圖：SDS親水端黏在蛋白質鏈上，厭水端朝外，因此經處理過的直線狀蛋白質鏈整體呈負電

E. 進行SDS-PAGE

 

進行SDS-PAGE時使電流從上而下，造成上端為負電場，下端為正電場。此時由於上述步驟處理過後的蛋白質帶負電，因此會從負極向正極跑。而電泳的速度則與蛋白質大小呈反比。（如右圖）

F. SDS-PAGE結果判讀：A是用來對比的已知標準品，將12345678的結果與對照組對照則可得出未知蛋白質的大小


資料來源：賓夕法尼亞大學