高效率液體層析法(HPLC High-performance liquid chromatography)

A. 為一高解析度的分離方法

B. 須使用一金屬管柱，緊密充填許多小直徑的小珠子，此時將蛋白溶液推進入管柱內。推入過程會產生極大的回壓，故須使用一高壓的幫浦，若使用玻璃或塑膠管柱則易破掉

C.HPLC可與三個原理做結合：


資料來源：維基百科

Gel filtration	Ion exchange	Reverse-phase
管柱內需填充許多含固定孔隙的beads	管柱內需填充帶正或負電荷團基的beads	管柱內需填充厭水性團基的beads
小分子會進入繞行，大分子則否	利用正負電荷吸引結合	利用不同蛋白厭水性的差異

D. reverse-phase HPLC：先沖提出來的是親水的胺基酸，這些胺基酸與厭水團基的結合力較弱。比較慢沖提出來的是厭水的胺基酸，這些胺基酸與厭水團基的結合力較強